PCR PARA LA TIPIFICACIÓN DE MUESTRAS CLÍNICAS DE LOS ANIMALES DOMÉSTICOS

Abstract

El desarrollo de este proyecto es con el fin de que la materia Temas selectos de profundización disciplinaria Bacteriología diagnóstica adquiera un conocimiento integral de las diferentes ramas del diagnóstico microbiano con las técnicas estándar de la microbiología convencional y la aplicación de herramientas moleculares como la PCR. Con el fin de que el estudiante conozca técnicas actuales que le permitan realizar su ejercicio profesional de mejor calidad y darle la seguridad en su quehacer diario. Para ello se realizaran tres prácticas de muestras, leche, orina e hisopo nasal, de enfermedades bacterianas más frecuentes en los animales domésticos, así como tres videos y un manual técnico digital. Las prácticas se impartirán en el laboratorio de Bacteriología y micología en la materia de temas selectos de profundización disciplinaria Diagnóstico bacteriológico de los animales domésticos. La materia se imparte en 60 horas, 6 horas diarias. Esta materia se abrió a partir de un proyecto PAPIME PE 205107, en el que se propuso el diseño de las prácticas y como producto un manual. El programa de la materia tiene 11 prácticas y 6 anexos, todas ellas diseñadas para que el alumno obtenga el conocimiento y desarrollar actitudes y aptitudes en el diagnóstico bacteriológico convencional, en el que aprenden a sembrar en diferentes medios de cultivo muestras clínicas, aislar e identificar bacterias con pruebas bioquímicas. Esta materia es apoyada por varios académicos expertos en el diagnóstico veterinario y desde el 2010 se imparte, a la fecha se han preparado más de 100 alumnos y cada día tiene más solicitudes por los alumnos para cursarla. Actualmente, es importante acceder a las nuevas técnicas de diagnóstico bacteriano como las técnicas moleculares que nos dan certeza para la identificación bacteriana. Es por ello, que se eligieron tres prácticas Análisis bacteriológico de leche, análisis bacteriológico de orina y análisis bacteriológico de excreciones para que el alumno aplique la PCR en las muestras clínicas y obtenga el conocimiento teórico-práctico de la extracción, purificación del ADN y la identificación del agente etiológico utilizando los cebadores necesarios para cada especie bacteriana involucrada. El alumno realizara en cada una de esas muestras seleccionadas el análisis bacteriológico convencional y la PCR, para que comprenda de la sencillez y complejidad de cada procedimiento, y obtendrá las habilidades y destrezas en el laboratorio de diagnóstico para establecer la etiología bacteriana de una muestra clínica. El alumno trabajará con muestras de leche, orina y excreciones que provienen de procesos infecciosos, para el caso de la leche debe conocer que la mastitis bovina es la inflamación de la glándula mamaria que puede ser causada por varias especies de bacterias. Se ha demostrado que la mayoría de las mastitis clínica y subclínica es causada por 10 especies bacterianas diferentes. Los patógenos asociados a la mastitis están clasificados como patógenos contagiosos y medio ambientales. Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, y Streptococcus dysgalactiae son patógenos contagiosos y pueden propagarse de vaca a vaca durante el ordeño. En la muestra de orina debe de conocer que el tracto urinario es estéril, situación dada por una variedad de mecanismos del huésped para prevenir la colonización y sobrevivencia de las bacterias. Las bacterias que causan infecciones urinarias generalmente son bacterias oportunistas de la microbiota intestinal que entra a la vejiga a través de la uretra. Las infecciones dependen de los factores anatómicos, mecanismos de defensa del huésped y de la patogenicidad del agente. Para los exudados, debe conocer que las infecciones del tracto respiratorio puede obtener hisopos nasales de las secreciones. La neumonía en los bovinos es una de las principales causas de pérdidas económicas debido a la alta mortalidad, costos en los tratamientos, mala conversión alimenticia, disminución en la ganancia de peso, falta de desarrollo corporal en la edad adulta y disminución en la producción de los hatos afectados. La etiología de estas neumonías puede ser multifactorial, dentro de las cuales se han involucrado agentes bacterianos y virales. Entre los agentes bacterianos mayormente aislados se mencionan a: Pasteurella multocida, Mannheimia haemolytica, Histophilus somni, Mycoplasma, Streptococcus spp. La importancia de establecer las especies de Mannheimia requiere de nuevos criterios de identificación que incluye las técnicas moleculares como procedimientos más sensibles. La eficiente prevención y control de la mannheimiosis bovina debe ser sustentada por un diagnóstico confiable y con buenas prácticas de manejo.